什么是 ELISA？

更新时间：2025-07-04

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ELISA 是一种对液体溶液中存在的抗原和抗体等蛋白质进行定性和定量分析的方法。将与目标抗原和抗体具有相同特异性结合能力的抗原和抗体制备在平板上，使其相互结合，最后与酶或染料发生反应，测量吸收光谱。ELISA 是酶联免疫吸附测定 (Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay) 的缩写，是一种免疫学测定方法。ELISA 利用抗原和抗体的特异性，是一种高精度的定性和定量分析方法。

ELISA试剂盒也已市售，广泛用于定量分析抗原和抗体。对于ELISA试剂盒而言，温度控制通常非常重要，因此必须注意避免因冰箱存放位置不同而产生的温差，并防止试剂盒因过冷而冻结。

根据 ELISA 方法，在进行定量分析之前可能还需要很多步骤，但最近已经开发出全自动测量设备，从而缩短了分析所需的时间。

ELISA 用途

ELISA 广泛应用于生物技术领域。例如，它用于分析血液（例如血浆和血清）中的抗原和抗体。通过采集血液样本并用 ELISA 测定自身抗体水平，可以诊断疾病或检查疫苗接种后的抗体滴度。因此，ELISA 广泛应用于医院血液检测的分析。近年来，越来越多的疾病通过 ELISA 进行研究。

还可以通过采集血液样本来检查食物中是否存在过敏原，并确定受试者是否有食物过敏。

使用 DNA 的 PCR 方法已成为检测冠状病毒抗原和抗体的流行方法，但 ELISA 分析试剂盒也可供出售。

ELISA 原理

ELISA 使用抗原抗体反应进行分析。

首先，将待测抗原与对该抗原具有特异性的抗体结合。为了检测结合的抗体，还需要将标记有特定酶的抗体与抗原结合。

与抗原、抗体、酶结合的目标物质，与酶发生反应而变色的底物混合，颜色根据目标物质的量而变化，因此用吸光光度计测定吸收光谱，进行定量、定性分析。

IgG抗体常用于免疫测定方法，包括ELISA。

ELISA方法

ELISA方法有多种，市面上也有各种类型的试剂盒。我们将介绍简单的直接法。其基本测定流程与其他方法并无太大区别。

首先，将与待测物质结合的抗体吸附到微孔板上。

使用加样吸量器将定量的液体样本加入微孔板中。在恒温箱中控温，使液体样本中的抗原和抗体与微孔板上的抗原和抗体发生反应并结合。然后洗去多余的抗体。

结合的抗体随后与特定酶发生反应。为了检测酶活性，需要添加一种与酶结合后吸收光谱会发生变化的底物，然后测量并分析反应后的吸收光谱。辣根过氧化物酶 (HRP) 通常用作显色底物。使用 HRP 时，必须注意不要使用涂有作为抑制剂的采血管，以防止污染。

最后，利用吸光度计测量并分析吸收光谱。

ELISA设备

ELISA通常需要多个步骤才能根据目标物质进行准确的分析，每个步骤都需要反复分液和清洗。此外，还需要移液器、微孔板、培养箱以及吸光度测量装置等设备。

最近，一种可在一台设备中实现移液和分光光度分析功能的装置被开发出来。由于无需人工干预即可全自动进行测量，因此可以减少错误并节省时间和精力。

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